技術文章
凱杰(QIAGEN)的RNA提取試劑盒種類非常多,針對不同的樣本來源(如血液、細胞、組織、植物等)和不同的RNA類型(總RNA、小RNA、miRNA等)有專門的系列。
其中經(jīng)典和常用的是 RNeasy系列(用于總RNA提取)。下面以 RNeasy Mini Kit (50) 為例,詳細介紹試劑盒中通常包含的組件。
重要提示: 不同試劑盒內(nèi)容物會略有差異,請務必以您手中的試劑盒說明書為準。
核心組件(以RNeasy Mini Kit為例):
一套標準的試劑盒通常包含以下物品:
凱杰rna提取試劑盒核心組件一:裂解結(jié)合體系
Buffer RLT: 裂解緩沖液。這是最關鍵的試劑,含有高濃度異硫氰酸胍(guanidine thiocyanate),能迅速裂解細胞并滅活RNase,保護RNA不被降解。
注意:使用前需按比例加入β-巰基乙醇(β-ME),β-ME是單獨提供的,不包含在試劑盒內(nèi),需用戶自備。
Buffer RW1: 洗滌緩沖液。用于第一次洗滌吸附在膜上的RNA,去除雜質(zhì)。
Buffer RPE: 洗滌和去鹽緩沖液(含乙醇)。用于第二次和第三次洗滌,能徹d去除鹽分和其他雜質(zhì),確保最終RNA產(chǎn)物的純度。
注意:使用前需按說明書要求加入指定體積的無水乙醇。
凱杰rna提取試劑盒核心組件二:純化組件
RNeasy Mini Spin Columns: 離心柱。核心純化裝置,柱子底部有硅膠膜,能在高鹽條件下特異性地吸附RNA,而蛋白、DNA等雜質(zhì)則被洗去。
Collection Tubes (2 mL): 收集管。用于裝載離心柱并承接流穿液。通常有1.5 mL和2 mL兩種規(guī)格,提供足量。
凱杰rna提取試劑盒核心組件三:洗脫液
RNase-free Water: 無RNase水。用于最后一步將純化的RNA從硅膠膜上洗脫下來。這是確保RNA不被降解的關鍵。
凱杰rna提取試劑盒核心組件四:其他可能包含的組件(取決于您購買的套餐)
蛋白酶K (Proteinase K): 用于消化蛋白含量特別豐富的復雜樣本(如動物組織)。
DNase I (RNase-Free DNase Set): 通常需要單獨購買,但有時會作為套餐的一部分。用于在純化過程中在柱上消化殘留的基因組DNA,避免DNA污染。如果購買,會包含:
DNase I 干粉
Buffer RDD (用于溶解和稀釋DNase I)
凱杰rna提取試劑盒核心組件五:耗材
試劑盒通常不包含但實驗必需的物品:
β-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)
無水乙醇(用于配制Buffer RPE)
1.5 mL無RNase的收集管(用于最后收集洗脫的RNA)
各種無RNase的槍頭和離心管
總結(jié)列表:
一個典型的RNeasy Mini Kit可能包含:
希望這個列表對您有幫助!實驗前請務必閱讀具體的產(chǎn)品說明書。
選購建議:
如果您處理的樣本含有大量基因組DNA(如基因組很大的動植物組織),強烈建議同時購買RNase-Free DNase Set,以便在純化過程中進行柱上DNA消化,獲得更純凈的RNA。
購買渠道:
凱杰代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司,歡迎咨詢選購。
北京百奧創(chuàng)新科技有限公司是一家專注于生命科學實驗室快速消耗品為主營方向的生命科技企業(yè),提供完整的產(chǎn)品和服務體系,為廣大的科研用戶提供實驗室一站式服務。益元利康已成為多家生物品牌的代理商,如賽默飛、Sigma、ALZET、MedKoo、EZB、WaKo、Zymo research、Qiagen等,為用戶提供完善的產(chǎn)品、專業(yè)的咨詢,助力推動中國生命科學研究快速發(fā)展。
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