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標(biāo)題:如何選擇和使用Alzet2004泵?(操作指南與注意事項)一、如何選擇和使用Alzet2004泵1.選型確認(rèn):2004型號是小鼠的標(biāo)準(zhǔn)選擇。務(wù)必根據(jù)實驗所需時長(≤28天)和流速要求(0.25μL/h)確認(rèn)。2.藥物溶液準(zhǔn)備:使用推薦溶劑(常用生理鹽水或特定緩沖液)。確保藥物在溶劑和實驗溫度下穩(wěn)定且可溶(混懸液需均勻且顆粒足夠小)。嚴(yán)格無菌操作!避免污染導(dǎo)致動物感染或藥物失效。3.泵的灌注:使用專用填充管和提供的工具,嚴(yán)格按照說明書操作,確保完q填充無氣泡。4.植入手術(shù)...
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標(biāo)題:反轉(zhuǎn)錄和逆轉(zhuǎn)錄的區(qū)別一、反轉(zhuǎn)錄(ReverseTranscription)1.定義:以RNA為模板合成DNA的過程,逆轉(zhuǎn)中心法則方向(RNA→DNA)。2.核心要素:3.催化酶:反轉(zhuǎn)錄酶(ReverseTranscriptase,RTase)4.常見來源:逆轉(zhuǎn)錄病毒(如HIV)、嗜肝DNA病毒、端粒酶5.反應(yīng)本質(zhì):RNA指導(dǎo)的DNA合成6.分子生物學(xué)實驗:RT-PCR:提取RNA→反轉(zhuǎn)錄為cDNA→PCR擴增目標(biāo)基因cDNA文庫構(gòu)建:將mRNA逆轉(zhuǎn)錄為雙鏈DNA并克隆7...
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標(biāo)題:T細(xì)胞激活磁珠指南:高效擴增/免疫治療核心工具|技術(shù)解析+選型攻略一、T細(xì)胞激活磁珠:免疫細(xì)胞治療革命的“發(fā)動機”在CAR-T療法、腫瘤免疫治療、疫苗開發(fā)等領(lǐng)域,T細(xì)胞的高效激活與擴增是成功的關(guān)鍵。傳統(tǒng)抗體刺激法存在激活效率低、細(xì)胞因子風(fēng)暴風(fēng)險高、操作繁瑣等痛點。解決方案:T細(xì)胞激活磁珠——通過超順磁性微球偶聯(lián)CD3/CD28抗體,模擬體內(nèi)抗原遞呈,實現(xiàn):95%T細(xì)胞活化率(遠超板包被法)擴增倍數(shù)提升5-10倍精準(zhǔn)控制激活強度,降低細(xì)胞因子釋放綜合征(CRS)風(fēng)險二、核...
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質(zhì)粒提取濃度低?6大核心原因+解決方案+避坑指南的知識干貨,分享給每位同學(xué)~一、質(zhì)粒濃度低直接后果:實驗全線崩潰!當(dāng)質(zhì)粒濃度<50ng/μL時:1.轉(zhuǎn)化失敗率↑300%2.測序信號弱(峰圖碎裂)3.酶切/連接效率暴跌立即排查以下6大關(guān)鍵環(huán)節(jié)!二、質(zhì)粒濃度低的6大核心原因+破解方案原因1:菌體量不足(占比~35%)錯誤操作:?OD???<0.6收菌→菌數(shù)太少?離心轉(zhuǎn)速<6000g→菌體丟失解決方案:收菌標(biāo)準(zhǔn):OD???=0.8-1.0(對數(shù)生長期)離心參數(shù):≥12,000g×2...
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一、磁極在磁性細(xì)胞分選中的作用原理磁性細(xì)胞分選的核心步驟是:磁性標(biāo)記:目標(biāo)細(xì)胞通過與表面包被有特異性抗體(針對目標(biāo)細(xì)胞表面標(biāo)志物)的超順磁性微珠結(jié)合,從而被“磁化”。磁場分選:將標(biāo)記好的細(xì)胞懸液通過或置于細(xì)胞分選磁極產(chǎn)生的磁場區(qū)域。分離捕獲:在高梯度磁場的作用下,結(jié)合了磁性微珠的目標(biāo)細(xì)胞會被強大的磁力捕獲并滯留在磁極表面或磁極內(nèi)部的分離基質(zhì)(如填充了鐵絲的柱子)上。未標(biāo)記的非目標(biāo)細(xì)胞則不受磁場影響(或影響極小),隨液體流穿過磁極區(qū)域。洗脫收集:移除磁場后,被捕獲的目標(biāo)細(xì)胞失去...
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