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蛋白質(zhì)凝膠電泳的原理是什么？有何注意事項(xiàng)？

你知道蛋白質(zhì)凝膠電泳的原理是什么嗎？有何注意事項(xiàng)？讓我們一起來看看吧！一、原理將蛋白質(zhì)樣品同離子型去垢劑十二烷基硫酸鈉（SDS)以及硫基乙醇一起加熱，使蛋白質(zhì)變性，多肽鏈內(nèi)部的和肽鏈之間的二硫鍵被還原，肽鏈被打開。打開的肽鏈考疏水作用與SDS結(jié)合而帶負(fù)電荷，電泳時(shí)在電場(chǎng)作用下，肽鏈在凝膠中向正極遷移。不同的肽鏈由于在遷移時(shí)受到的阻力不同，在遷移過程中逐漸分開，其相對(duì)遷移率與分子量的對(duì)數(shù)間成線性關(guān)系。二、注意事項(xiàng)1.由于與凝膠聚合有關(guān)的硅橡膠稱、玻璃板表面不光滑潔凈，在電泳時(shí)會(huì)...

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蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法有哪些？

蛋白質(zhì)含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)可以用于測(cè)定蛋白質(zhì)濃度和檢測(cè)所提取的蛋白質(zhì)含量，那么蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、folin—酚試劑法這種蛋白質(zhì)測(cè)定法是zui靈敏的方法之一。過去此法是應(yīng)用zui廣泛的一種方法，由于其試劑的配制較為困難，近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即folin-酚試劑，以增加顯色量，從而提高了檢測(cè)蛋白質(zhì)的靈敏度。這兩種顯色反應(yīng)產(chǎn)生深蘭色的原因是：在堿性條件下，蛋白質(zhì)中的肽鍵與銅結(jié)合生成復(fù)合物...

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懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項(xiàng)有哪些？

懸浮培養(yǎng)指的是一種在受到不斷攪動(dòng)或搖動(dòng)的液體培養(yǎng)基里，培養(yǎng)單細(xì)胞及小細(xì)胞團(tuán)的組織培養(yǎng)系統(tǒng)，那么懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項(xiàng)有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、步驟1.將準(zhǔn)備好的凍存細(xì)胞放入37℃水浴中解凍。2.用70%乙醇對(duì)頂端進(jìn)行消毒，用吸管將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有5mlwan全MEM-10培養(yǎng)基的25cm2組織培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞均勻分布于培養(yǎng)瓶中，放入5%CO2加濕培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)過夜。3.將培養(yǎng)基吸出，用0.5ml37℃的胰酶/EDTA覆蓋細(xì)胞，消化30~40...

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貼壁細(xì)胞培養(yǎng)的步驟有哪些？

在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，必須有可以貼附的支持物表面，其依靠自身分泌或培養(yǎng)基中的貼附因子才能在該表面生長(zhǎng)增殖的離體動(dòng)物的培養(yǎng)細(xì)胞。那么貼壁細(xì)胞培養(yǎng)的步驟有那些呢？讓我們一起來看看吧！1.將含有凍存細(xì)胞的安瓿放入37℃水浴中解凍。2.用70%乙醇對(duì)安瓿的頂端進(jìn)行消毒，打開安瓿，用吸管將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有5ml起始培養(yǎng)基的25cm2組織培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞均勻分布于培養(yǎng)瓶中，將其放入5%CO2加濕培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)過夜。3.吸出起始培養(yǎng)基，換成適當(dāng)?shù)木S持培養(yǎng)基。將細(xì)胞放回CO...

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如何確認(rèn)RNA的質(zhì)量？

樣本種類繁多且復(fù)雜，有些樣本，要想提取到質(zhì)量良好的RNA是非常困難的，那么該如何確認(rèn)RNA的質(zhì)量呢？讓我們一起來看看吧！確認(rèn)RNA的質(zhì)量有以下兩種常見方法1）檢測(cè)RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分別代表了核酸、背景（溶液渾濁度）、鹽濃度和蛋白等有機(jī)物的值。一般的，我們只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82.0時(shí)，我們認(rèn)為RNA中蛋白或者時(shí)其他有機(jī)物的污染是可以容忍的，不過要注意，當(dāng)你用Tris作為緩沖液檢測(cè)吸光度時(shí)，R值可能會(huì)大于...

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