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你知道ELISA試劑盒的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。Elisa試劑盒在國內有許多種叫法,例如:Elisa檢測試劑盒、ElisaKit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,Elisa生物試驗...
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根據試劑的來源和標本的性狀及檢測的具備條件的不同,所使用的檢測方法也不同,那么ELISA檢測方法有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、雙抗體夾心法測抗原雙抗體夾心法是將特異性抗體結合到固相載體上形成固相抗體,然后和待測血清中的響應抗原結合形成免疫復合物,洗滌后加酶標記抗體,與免疫復合物中的抗原結合形成酶標抗體-抗原-固相抗體復合物,加底物顯色,判斷抗原的含量。二、競爭法首先將特異性抗體包被于固相載體表面,經洗滌后分成兩組:一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液,另一組只加酶標記抗原,...
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你知道不同動物細胞或組織的蛋白質抽提步驟是怎樣的嗎?讓我們一起來看看吧!一、培養的貼壁動物細胞的蛋白質抽提步驟1.從貼壁細胞培養瓶中小心傾去培養液。2.預冷的PBS清洗貼壁的細胞2次,小心傾去PBS。3.配置含抑制劑的蛋白質抽提試劑(1ml抽提試劑中加入5μl蛋白酶抑制劑混合液,5μlPMSF和5μl磷酸酶混合液)。4.細胞瓶中加入預冷的含抑制劑的蛋白質抽提試劑(107個細胞中加入1ml抽提試劑;5×106個細胞中加入0.5ml抽提試劑),輕輕搖動5分鐘。5.用一預冷的橡膠和...
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質粒構建是指選定的目的外源基因(DNA)先要經過PCR擴增。隨后用限制性內切酶分別切割載體和外源DNA片段,再使用DNA連接酶將切割后的載體與DNA片段連接,轉入宿主細胞。最后經過篩選鑒定出正確的重組克隆質粒,實現目的基因在宿主細胞內的正確表達。那么質粒構建實驗影響因素有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、載體的選擇在選擇克隆載體時應注意以下幾點:①具有自主復制能力,拷貝數高;②攜帶易于篩選的選擇標記;③含有多種限制酶的單一識別序列,以供外源基因插入;④載體應盡可能小(<15kb...
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